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藻蓝蛋白亚基细胞渗透渗出性及对肿瘤细胞光敏感化的研究

文章来源: 宾美生物科技 teammirza.com   发布时间: 2014-06-08 00:41 浏览: 

 藻蓝蛋白 ( P h y c o c y a n i n , P C ) 是螺旋藻中所含有
的一种重要的捕光色素蛋白 。 由开链四吡咯化合物
和脱辅蛋白经过过程硫链键结合
[ 1]
。 平日藻蓝蛋白是以
六聚体 ( α β ) 6 的情势存在 , α 亚基含有 1个藻蓝胆素
( P h y c o c y a n o b i l i n, P C B) , 分子量为 18. 5 K D, β 亚基
含有 2 个 P C B基团 , 分子量为 20. 5 K D 。 在中性条
件 , 藻蓝蛋白在 635 n m光激起下 , 其最大年夜荧光发射
光谱峰位于 650 n m处
[ 2]
显示出白色的荧光 。 近年
来 , 随着对陆地生物质源研究的加深 , 藻蓝蛋白在医
学保健等方面的功能也逐步被人们发明 。 王勇
[ 3]

发明直接参加 80 μ l / m L藻蓝蛋白时可以对人宫颈
癌细胞 H e l a 有 3 1. 0 %的克制造用 。 关燕清
[ 4]
等通
过光固定法固定藻蓝蛋白 , 对肝癌细胞 740 2的克制
率进步到 55 %。
蔡心涵
[ 5]
经过过程实验证明 , 藻蓝蛋白在对肿瘤的
光动力学治疗 ( P D T , p h o t o d y n a m i c t h e r a p y ) 中可以起
到增敏的感化 。 黄蓓等
[ 6]
纯化出藻蓝蛋白的三个组
分 。 在浓度为 100 μ g / m L , 照射剂量 28 . 8 J / c m
2
时 ,
它们对肿瘤细胞的杀伤率达 69. 2 % ~ 80. 2 % 。 同
时也证明 , 藻蓝蛋白的酶解产品介导的 P D T可以对
小鼠移植瘤 S 18 0有 46 % ~ 81 % 的抑瘤率 。
本实验拟从藻蓝蛋白样品平分别藻蓝蛋白亚基 ,
肯定其对细胞的最好渗透渗出浓度和时间 。 在此基本上 ,
以 H e - N e 激光器为光源 , 研究藻蓝蛋白亚基介导的
P D T 对 S P 2 / 0、 S 18 0、 C O S 7、 C 6等细胞的克制造用 。 从
而为藻蓝蛋白亚基作为光敏剂供给实际根据 。
1  材料与办法
1 . 1   实验材料与仪器
1 . 1 . 1   实验材 料   C O S 7 细胞 ( 非洲绿猴 S V 4 0 转
化的肾细胞 ) , S 1 80( 小鼠赘瘤细胞 ) 细胞 , 来自中科
院上海细胞库 , S P 2- 0- A g 1 4( 小鼠骨髓瘤细胞 ) 来自
安徽安科生物工程 ( 集团 ) 无限公司 , 神经胶质瘤细
胞 C 6( 大年夜鼠神经胶质瘤细胞 ) 由安徽大年夜先生命迷信
学院孙敏博士惠赠 。 R P M I - 164 0 培养基购自 I n v i t r o -g e n 。 胰酶 ( 1 ∶ 125 ) 购自 G i b i c o 公司 。 小牛血清购
自中国医 学迷信院血液 研究所 。 琼葡 糖凝胶 G75
F F , 北京韦氏博慧色谱科技公司 。
1 . 1 . 2   实验仪器   氦氖激光器 ( 45 m W) 购自南京
来创激光科技无限公司 , 210 型功率计购自 C O H E R -E N T , U S A。 S U N R I S E酶标仪 , 奥天时 。 可见紫 外分
光度计 , B X51 / B X 5 2体系荧鲜明微镜 , O L Y M P U S , 日
本 。 C O 2 培养箱 , S H E L L A B , U S A

1. 2   实验办法
1. 2 . 1   藻蓝蛋白亚基的制备
[ 7 ]
  本实验以钝顶螺
旋藻 ( S p i r u l i n a p l a t e n s i s ) 为原料 , 采取黄蓓等
[ 6]
提取
藻蓝蛋白的办法取得藻蓝蛋白成品 。 用 P B S 溶液配
制 5 m g / m L 的藻蓝蛋白溶液 , 置室温下 5 d 。 S e p h a -r o s e G75 F F经蒸馏水及 P B S 预处理后 , 将上述藻蓝
蛋白溶液过柱层析 。 搜集样品冷冻枯燥得藻蓝蛋白
亚基组分 。
1. 2 . 2   C O S 7, C 6 , S P 2 / 0 , S 18 0 细胞株的培养   无
菌条件下 , 将 C O S 7, C6, S P 2 / 0, S 180 细胞置 于 R P -M I 1640 + 10 % 小牛血清的培养基中 , 于 37 ℃, 5 %
的 C O 2 中停止传代培养 。
1. 2. 3  荧鲜明微镜法不雅察藻蓝蛋白亚基在细胞中
的渗透渗出特点   将 1 ×10
5
个 / m L发展旺盛的细胞 , 接
种到置有盖玻片的六孔培养板中 , 每孔 2 m L , 住宿培
养使细胞贴壁 。 在参加样品前 , 用无血清培养基置换
含有小牛血清的培养基 。 每隔 1 h向六孔板中参加
5 m g / m L 的藻蓝蛋白色素肽溶液 50 μ L , 分别在 1 h 、
2 h 、3 h 、 4 h 、5 h 、6 h 取样 。 用 P B S 清洗盖玻片 3 次
后 , 用荧鲜明微镜不雅察并摄影 。 P B S : N a c l8 g , K c l
0. 2 g , N a 2 H P O 4 1. 15 g , K H 2P O 4 , H2 O 1 000 m L , p H
7. 2.
1. 2 . 4   M T T 检测法
[ 8]
  将细胞调理浓度至 0. 5 ×
1 0
5
个 / m L , 向 96 孔板每孔参加 4 5 μ L的细胞悬液 ,
经住宿培养使细胞贴壁 , 吸去培养基 , 置换成等量无
血清 1 640 培养基 , 参加 5 μ L 藻蓝蛋白亚基样品后 ,
使药物浓度分别达到预设浓度 。 渗透渗出一准时间后 ,
用氦氖激光器照射 , 然后参加 50 μ L含有 8 %小牛
血清的 1 640 培养基持续培养 。 20 h 后 , 向每孔中加
入 10 μ L5 m g / m L M T T , 再置入细胞培养箱中 4 h , 从
每孔中吸去 10 0 μ L细胞培养液 , 再参加 150 μ LD M-S O, 5 m i n 后用酶标仪在 5 70 n m处读取数据 。
2  实验成果与分析
2. 1   藻蓝蛋白亚基的光谱特点及稳定性
对柱层析分别的样品停止波长扫描可知 , 本样
品在 6 20 n m邻近有藻蓝蛋白的特点峰
[ 6 ]
。 经 P A G E
电泳并在紫外光下不雅察到本样品由 α 、 β 亚基构成 ,
分子量分别在 18 k D与 20 k D阁下 , 与王勇
[ 2]
等人获
得的成果雷同 ( 见图 1 A) 。 由于 α , β 亚基分子量很
接近 , 分别难度比较大年夜 , 黄峙
[ 9]
等报导应用液相等电
聚焦电泳法纯化出 α 和 β 亚基 , 但这类办法操作比
较烦杂 。 本实验发明 , 藻蓝蛋白在室温下 5 d 后 , 再次以 P A G E电泳检测其组分 , 发明 β 亚基曾经降解
殆尽 ( 见图 1 B ) 。 解释 β 亚基相关于 α 亚基是不稳
定的 , 张厚森
[ 10]
等对此景象做过报导 。 故本实验采
用天然降解法这类简略单纯的办法取得 α 样品 。
图 1 A : 在紫外 光照射下 不雅察到的 α 、 β 亚基 ; B : α / β
亚基 在室温条件 下 5 d 后 , β 亚基 降解
F i g . 1 A : P C αa n dβ s u b u n i t s h a v eb e e nf o u n du n d e r
u l t r a v i o l e t r a d i a t i o n , B :T h eβ s u b u n i t d e c o m p o s e di n 5
d a y s a t r o o mt e m p e r a t u r e
2. 2   藻蓝蛋白亚基在细胞内的渗透渗出特点
为寻 找 激 光 照 射 的 最 佳 时 间 , 本 实 验 选 用
7 5 μ g / m L 藻蓝蛋白 α 亚基和 α / β 亚基溶液对 C O S 7、
C6 、 S 180、 S P 2 / 0 细胞停止渗透渗出实验 , 成果发明 , 藻蓝
蛋白 α / β 亚基在参加到细胞中 2 h 后可以不雅察到其
开端附着在细胞的外面 , 3 h 后可以通过细胞膜进入
胞质中 , 并在 4 h 时在胞质内均匀分布 , 终究在 5 h
后可以完全分布在全部细胞中 。 在 S 180 细胞中 , 可
以在加样 2 h后检测到 荧光的存在 , 并持续到 5 h
后 。 但在 S P 2 / 0 细胞中 , 唯一 α 亚基的溶液则检测
不到足够强的荧光存在 。
比较成果显示 , 藻蓝蛋白 β 亚基的荧光强度较 α
亚基强 ; 关于本文所涉细胞 , α / β 亚基可以加样后约
4 h 充分进入细胞内 , 但细胞之间稍有差别 。
组 A是 在正常光下 不雅察的对 照组 ; B 组 到 E组均在 紫外照射下 不雅察的实 验组 , 组 B 、 C 、D 、 E分别 为加样 2 h 、 3
h 、 4 h 、 5 h 后 取样不雅察的 成果 。
F i g u r e s i nL i n e Aa r e c o n t r o l s w h i c h a r e o b s e r v e d u n d e r v i s i b l e l i g h t . F i g u r e s i n L i n e Bt o l i n e Ea r e p h o t o g r a p h e d b y
f l u o r e s c e n c e - m i c r o s c o p e u n d e r u l t r a v i o l e t r a d i a t i o nf r o m 2 h t o5 h w i t h1 h a s t h e i n t e r v a l .
图 2 藻蓝蛋 白亚基对 C O S 7、C 6、S 1 80、S P 2 /0 细胞 渗透渗出性实验
F i g . 2 T h e p e r v a s i o ne x p e r i m e n t o f C - P Cs u b u n i t s o nC O S 7, C 6, S 1 80, S P 2 /0 c e l l l i n e s
2 . 3   藻蓝蛋白亚 基介导的 P D T 对细胞存 活率的
影响
2 . 3 . 1  藻 蓝蛋 白 α 亚 基 与 α / β 介 导 的 P D T 对
S P 2 / 0 生计率的影响   为了商量 α 和 β 亚基在 P D T
过程当中所起的感化 , 根据上述细胞渗透渗出实验的成果 ,
本实验选用 4 h 为 S P 2 / 0 的渗透渗出时间 , 以 H e - N e 激光
器为激起光源 , 照射剂量为 22. 3 J / c m
2
。 成果发明 ,
α 亚基的 P D T 感化明显比 α / β 亚基介导的 P D T强 ,
见表 1 。 可以推想 , α 亚基在 P D T 感化中起到重要的
感化 。表 1  藻蓝蛋白 α 亚基与 α / β 亚基介导的 P D T 对
S P 2 / 0 细胞生计率影响的比较
T a b . 1  C o m p a r i s o n o f t h e P D Te f f e c t b e t w e e nP C α
a n dα / β s u b u n i t s o n S P 2 / 0 c e l l l i n e
浓 度 反复次数 存活率
C o n c e n t r a t i o n R e p e a t n u m b e r S u r v i v a l r a t e ( %)
μ g / m L C o n t r o l αP D T α /β P D T
0 1 2 1 0 0 1 03. 2 1 00. 2
25 1 2 9 6. 5 9 6. 9 9 8. 4
50 1 2 9 2. 5 5 0. 0 8 5. 7
75 1 2 8 4. 4 3 0. 9 7 8. 6
1 00 1 2 8 6. 9 2 1. 4 7 5. 9
注 : 氦氖 激光 器波 长 为 63 2. 8 n m; P D T照 射 剂 量为 2 2. 3 2
J / c m
2
。 P< 0. 00 1。
2 . 3 . 2   藻蓝蛋 白亚基介导的 P D T 在不合 的照射
剂量下对 S P 2 / 0 细胞存活率的 影响   由以上实验
可知 , 75 μ l / m Lα 亚基可以在包管渗透渗出后果的条件
下 ( 4 h ) 对 S P 2 / 0 的存活率有较大年夜的克制造用 , 在此
条件下商量不合照射剂量对 S P 2 / 0 细胞存活率的影
响 。 本 实 验 分 别 选 用 1. 8 6 J / c m
2
、 3 . 72 J / c m
2

5. 58 J / c m
2
、7. 44 J / c m
2
、 14. 88 J / c m
2
、 22. 32 J / c m
2

37 . 2 J / c m
2
的不合照射剂量停止实验 , 表 2 成果显
示 : 随着照射剂量的增大年夜 , P D T 感化将随之加强 , 当
照射剂量为 37. 2 J / c m
2
时 , 75 μ l / m L α 亚基 P D T作
用使 S P 2 / 0细胞生计率降低到 18. 4 %, 然则推敲到照
射时的热效应 。 照射剂量以 22 . 3 J / c m
2
阁下为好 。
表 2  藻蓝蛋白 α 亚基在不 同照射剂量下 的 P D T
对 S P 2 / 0 细胞存活率的影响
T a b . 2   P D Te f f e c t o f p h y c o c y a n i ns u b u n i t sα o n t h e
s u r v i v a l r a t e o f S P 2 / 0 c e l l s i r r a d i a t e d b y d i f f e r e n t d o s e s
照射剂量 反复次数 存活率
C o n c e n t r a t i o n R e p e a t n u m b e r S u r v i v a l r a t e ( %)
J / c m
2
P Co n l y P D T
1 . 86 1 2 1 00. 3 9 8 . 9
3 . 72 1 2 9 7. 5 8 7 . 3
5 . 58 1 2 9 3. 7 6 3 . 9
7 . 44 1 2 8 4. 4 2 8 . 2
1 4. 8 8 1 2 8 6. 5 2 3 . 3
2 2. 3 2 1 2 8 3. 6 2 1 . 4
3 7. 2 0 1 2 7 9. 8 1 8 . 4
注 : 氦 氖激光器波 长为 6 32. 8 n m , 感化 浓度为 75 μ L / m L 。
2. 3 . 3  藻 蓝 蛋白 α 亚 基 介 导 的 P D T对 C O S 7 、
C 6 、 S 18 0 细胞存活率的影响   为进一步商量 α 亚基
对不合细胞 P D T 感化后果 , 本实验选用 C O S 7为正常
贴壁细胞的代表 , C 6为贴壁瘤细胞的代表 , S 180 为悬
浮瘤细胞的代表 , 氦氖激光的照射剂量为 22. 3 J / c m
2
,
样品的渗透渗出时间为 4 h , 表 3 成果显示 : 由 α 亚基介导
的 P D T 感化关于 C O S 7 、 C6 、 S 180 细胞存活率都有必定
的影响 , 分别为 82. 2 %、70. 8 % 及 60. 2 %。
表 3  藻蓝蛋白 α 亚基介导的 P D T 对 C O S 7 、 C 6、 S 180 细胞存活率的影响
T a b . 3  P D T e f f e c t o f P C α s u b u n i t o n t h e s u r v i v a l r a t e o f C O S 7, C 6 , S 18 0 c e l l l i n e s
浓度 反复次数 存活率
C o n c e n t r a t i o n R e p e a t n u m b e r S u r v i v a l r a t e ( % )
μ g / m L C O S 7 o n l y C O S 7 P D T C 6 o n l y C6 P D T S 18 0 o n l y S 18 0 P D T
0 1 2 1 00. 0 10 0. 9 1 0 0 . 0 1 05. 0 1 00 9 4. 7
25 1 2 9 9. 8 9 1. 5 1 0 2 . 1 1 00. 5 10 3. 5 7 8. 2
50 1 2 1 00. 8 9 3. 3 1 0 0 . 6 9 0. 6 9 9 . 4 7 4. 4
75 1 2 9 8. 7 8 5. 2 98. 7 8 1. 0 9 8 . 8 7 2. 1
10 0 1 2 1 03. 2 8 2. 2 1 0 1 . 2 7 0. 8 10 9. 5 6 0. 2
注 : 氦氖 激光器波长 为 63 2. 8 n m ; P D T 照射 剂量为 2 2. 32 J / c m
2

3  评论辩论
自 C a i
[ 5]
等发明藻蓝蛋白可以作为光动学增敏
剂以后 , 藻蓝蛋白感化光动力学疗法的才能越来引
起人们的兴趣 。
本实验发明 , β 亚基在室温条件下轻易降解 , 利
用这类特点 , 可以便利有效地取得 α 亚基溶液 , 而不
需复杂的亚基分别过程 。
为商量藻蓝蛋白两种亚基在细胞内的渗透渗出特点
及 P D T 感化后果 , 我们分别用 α 亚基及 α / β 亚基溶
液对 S P 2 / 0 停止渗透渗出实验 , 成果显示 75 μ g / m L α / β
亚基可以在 4 h 阁下时充分地进入细胞内 , 并可以在
687 第 6 期          谭  阳等 : 藻蓝蛋 白亚基细 胞渗透渗出性及 对肿瘤细 胞光敏感化 的研究           
细胞的稳定存在 2 h 以上 , 解释藻蓝蛋白亚基在细胞
内比较 稳定 。 α 亚基溶液 也能够 在 2 h以落后 入
S P 2 / 0 细胞内 , 但荧光的强度不如 α / β 亚基 。 产生
这类差别缘由在于 α 亚基含有 1个 P C B, β 亚基含有
2 个 P C B , 故 β 亚基在细胞内的荧光强度要比 α 亚基
强 。 为进一步 验证这 种说法 , 用 α / β 亚基 溶液 对
S 1 80、 C O S 7、 C6细胞的渗透渗出发明 , 2 h 可以检测到 P C
部分进入细胞质内 , 并在细胞内稳定存在 。
推敲到 H e - N e 激光器价格低 , 应用便利的特点 ,
本实验采取 H e - N e 激光器 ( 40 m W) 为激起光源 , 用
M T T法检测在激光照射条件下藻蓝蛋白亚基对肿瘤
细胞的存活率的影响 。 比较成果解释 : 藻蓝蛋白中
的 α 、β 亚基稳定性和感化其实不雷同 , 由 α 亚基介导
的 P D T 感化比由 β 亚基的 P D T感化明显 , 但 α 亚基
的荧光特点不是如 β 亚基强 , β 亚基可作为细胞渗
透性的优胜指导物 。
以上成果解释 , 100 μ g / m L 的藻蓝蛋白亚基在细
胞内渗透渗出 4 h 后 , 赐与 22. 3 J / c m
2
的激光照射 , 可以或许
在包管光敏剂充分进入细胞内 , 并取得最好的 P D T
克制后果 , 且 α 亚基介导的 P D T关于不合细胞的抑
制造用表示出必定的差别性 : 对 S P 2 / 0和 S 180 两种
悬浮肿 瘤 细 胞 的 抑 制 率 可 分 别 达 到 78. 6 %和
39 . 8 %, 强 于 C6 和 C O S 7 这 两 种 贴 壁 细 胞 的
29 . 2 %和 17 . 8 %, 作为正常细胞代表的 C O S 7 细胞
对 α 亚基介导的 P D T 最为守旧 。
综上所述 , 藻蓝蛋白亚基介导的 P D T在必定的
条件下可以或许有效地克制肿瘤细胞发展 , 然则今朝对
于其克制肿瘤细胞发展的机制和若何进一步进步
藻蓝蛋白光动力学抗肿瘤效力须要进一步的商量 。
R e f e r e n c e s
[ 1 ]  易 国良 , 蒋丽 金 , 马 金 石 . 藻 胆 蛋白 生 物合 成 的 模型 反 应
Ⅰ . 藻蓝胆 素硫 醚 键的 形 成 [ J ] . 化 学 学 报 , 1991( 1) :94 -97.
Y I G u o - l i a n g , J I A N GL i - j i n , M AJ i n - s h i .AM o d e l R e a c t i o no f
B i o s y n t h e s i so fP h y c o b i l i p r o t e i n s Ⅰ .T h i o e t h e rF o r m a t i o n o f
P h y c o c y a n o b i l i n[ J ] . A c t aC h i m i c a S i n i c a , 1991( 1) :94- 97 .
[ 2 ]  王勇 , 钱 凯先 , 董强 . 高纯度 藻蓝蛋 白分别 纯化及 光谱特 性
研究 [ J ] . 生 物 化学 与 生 物物 理 进 展 , 1999, 2 6( 5) :4 57 -460.
WA N GY o n g , Q I A NK a i - x i a n , D O N GQ i a n g . T h e S t u d y f o r I s o -l a t i o na n dP u r i f i c a t i o no f P h y c o c y a n i nw i t hH i g hP u r i t ya n dI t s
S p e c t r aC h a r a c t e r i s t i c [ J ] .P r o gB i o c h e m B i o p h y s , 1999, 26
( 5) :457- 460 .
[ 3 ]  王勇 , 钱峰 , 钱 凯先 , 等 . 藻 蓝蛋白的 抗癌活 性研究 [ J ] . 浙江
大年夜学学报 ( 工学版 ) , 2001, 35( 6) :92 -95 .
WA N GY o n g , Q I A N G F e n g , Q I A NK a i - x i a n , e t a l . A n t i c a n c e r
A c t i v i t yo f P h y c o c y a n i n [ J ] .J o u r n a l o f Z h e j i a n gU n i v e r s i t y ,
2001, 35( 6) :92- 95 .
[ 4]  关燕清 , 徐 和 德 , 郭 宝江 . 光 固定 化藻 蓝蛋 白对 体外 肝癌 细
胞 7402 的克制造 用 [ J ] . 离 子交 换 与 吸附 , 200 0 , 16 ( 6) :
547- 552.
G U A NY a n - q i n g , X UH e - d e , G U OB a o - j i a n g . I n h i b i t i o nA c t i v i -t y o f P h y c o c y a n i nI m m o b i l i z a t i o nB i o m a t e r i a l o nP r o l i f e r a t i o no f
L i v e r C a n c e r C e l l s7402 [ J ] .I o nE x c h a n g ea n dA d s o r p t i o n ,
2000, 16 ( 6) :547 -552 .
[ 5]  蔡心涵 , 何立 明 , 蒋家伦 , 等 . 螺旋 藻藻蓝 蛋白 对癌 激光 疗法
增敏感化的实 验研究 [ J ] . 中国海 洋药物 , 199 5 , 1:15- 18.
C A I X i n - h a n , H EL i - m i n g , C A I J i a - l u n , e t a l . T h e E p e r i m e n t a l
S t u d yo f A p p l i c a t i o no nP h y c o c y a n i ni nC a n c e r L a s e rT h e r a p y
[ J ] . C h i n e s e J o u r n a l o f M a r i n e D r u g s , 1995, 1:15- 18.
[ 6]  黄蓓 , 王广 策 , 李振 刚 . 藻 蓝 蛋白 色素 肽光 动力 学抗 肿瘤 作
用的实验研究 [ J ] . 激光生物学报 , 2002, 11( 3) , 194- 198 .
H U A N G B e i , WA N G G u a n g - c e , L IZ h e n - g u a n g .A n t i t u m o r
S t u d i e s o f C - p h y c o c y a n i n C h r o m o p h o r e P e p t i d e s M e d i a t e dP h o t o -d y n a m i cT h e r a p y [ J ] .A c t aL a s e rB i o l o g yS i n i c a , 2002, 1 1
( 3) , 194- 198 .
[ 7]  M O S M A N T . R a p i dC o l o r i m e t r i cA s s a yf o r C e l l u l a r G r o w t ha n d
S u r v i v a l A p p l i c a t i o nt o P r o t i f e r a t i o na n dC y t o t o x i c i t yA s s a y [ J ] .
I m m u nM e t h o d , 1983, ( 65) :55 .
[ 8 ]  黄峙 , 杨芳 , 郑文杰 , 等 . 用 液相 等电聚 焦电 泳纯 化藻 蓝蛋
白亚基 [ J ] . 高等学 校化学学报 , 2006 , 27 ( 6 ) :1051 -1054 .
H U A N GC h i , Y A N GF a n g , Z H E N GWe n - j i e , e t a l . P u r i f i c a t i o n
a n dP r e p a r a t i o no f A c t i v e S u b u n i t s o f C - p h y c o c y a n i nb ya P r o t o -c o l o f L i q u i d - p h a s e I s o e l e t r i c F o c u s i n g[ J ] . C h e m i c a l J o u r n a l o f
C h i n e s e U n i v e r s i t i e s , 2006, 27( 6) :1051- 1054.
[ 9]  张厚森 , 马 海乐 . 钝 顶 螺旋 藻 藻 蓝蛋 白 的 稳定 性 试 验研 究
[ J ] . 食品研究与 开辟 , 2005( 3) :74- 76.
Z H A N GH o u - s e n , MAH a i - l e . S t a b i l i t y o f P h y c o c y a n i ni nS p i r -u l i n aP l a t e n s i s [ J ] .F o o d R e s e a r c ha n dD e v e l o p m e n t , 200 5
( 3) :74- 76 .

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